期刊简介

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  • 杂志名称:医药前沿杂志
  • 主管单位:河北省卫生健康委员会
  • 主办单位:河北省疾病预防控制中心
  • 国际刊号:2095-1752
  • 国内刊号:13-1405/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:知网收录(中), 万方收录(中)
医药前沿杂志2014年第03期

一种新型抗乳腺癌双重靶向性融合蛋白的诱导表达和纯化

顾丽;杨丽;丁海麦;魏春华;苏燕(通讯作者)

关键词:乳腺癌, 人催乳素受体拮抗剂, 肿瘤抑素, 融合蛋白Del1-9-G129R-T3
摘要:目的:将已构建好的新型抗乳腺癌双重靶向性融合蛋白Del1-9-G129R-T3的原核表达载体转化入原核表达宿主,诱导融合蛋白的表达,对之进行鉴定后进行分离纯化。方法:将融合蛋白重组表达质粒pET22b-Del1-9-G129R-T3转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达,收集菌体进行超声破碎,高速离心分离沉淀和上清。通过SDS-PAGE和Western blot对目的蛋白的表达进行检测和鉴定,利用亲和层析纯化融合蛋白。结果:SDS-PAGE结果显示,在诱导表达菌超声破碎后的沉淀物中出现一与预期分子量约24.7 kD大小相吻合的新蛋白区带,表明融合蛋白可能主要存在于细胞质中,形成不溶性包涵体。Western blot分析显示,蛋白在预期分子量处出现印迹。结论:融合蛋白Del1-9-G129R-T3已经在大肠杆菌中高效表达,为下一步融合蛋白的功能研究奠定基础。